最近有個(gè)客戶表示自己是剛剛接觸化測(cè)的藥廠化驗(yàn)員,最近在用微生物限度檢測(cè)儀做純化水的微生物檢測(cè),他想問問,純化水微生物限度檢查法具體是如何做的。這個(gè)好像藥典有,但他沒找著。希望我們能指點(diǎn)一下!
大概就是把純化水永薄膜過濾器濾過,把薄膜放入培養(yǎng)基中培養(yǎng),但是,他想知道具體一點(diǎn)的。下面我們上海恩計(jì)小編就針對(duì)客戶提出的這個(gè)純化水微生物限度檢查法怎么操作的做出具體回答。
一、純化水進(jìn)行微生物限度檢查的原因
在醫(yī)藥的生產(chǎn)過程中,純化水的質(zhì)量是關(guān)系到藥品質(zhì)量的一個(gè)首要原因。純化水在生產(chǎn),儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)倪^程中,非常容易受到微生物的污染,因此對(duì)于水質(zhì)的日常檢測(cè)是質(zhì)量部門一個(gè)重要工作。對(duì)于純化水微生物限度檢查,各國所使用的方法不外乎與培養(yǎng)基澆注法,涂布法,膜過濾法,以及最大可能數(shù)法,最大的區(qū)別在于所使用的培養(yǎng)基不同。
二、采用微生物限度檢查薄膜過濾法的優(yōu)點(diǎn)
采用濾膜法進(jìn)行微生物檢測(cè)是一種國際公認(rèn)的微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的藥典、FDA和EPA等組織的承認(rèn),廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品及飲料工業(yè)、化妝品、制藥工業(yè)品質(zhì)控制和電子工業(yè)等領(lǐng)域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測(cè)產(chǎn)品成功地應(yīng)用于濾膜法已有20多年的歷史,實(shí)用而且方便實(shí)用,它簡(jiǎn)化了微生物檢測(cè)程序。
濾膜法微生物檢測(cè):
將適當(dāng)孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由于濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾后用無菌水沖洗濾器而除去。然后,將濾膜放在培養(yǎng)基上培養(yǎng),營養(yǎng)物和代謝物通過濾膜的微孔進(jìn)行交換,在濾膜表面上培養(yǎng)出的菌落可以計(jì)數(shù),并和樣品量相關(guān)。
濾膜法的優(yōu)點(diǎn):
- 與直接法比較,可以檢測(cè)大量的樣品
- 濃縮效應(yīng)使微生物檢測(cè)的準(zhǔn)確度提高
- 帶有菌落的濾膜,可作為檢測(cè)的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對(duì)應(yīng),得出定量結(jié)果
操作具體一點(diǎn)就是:薄膜過濾法檢測(cè),一個(gè)樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,制成10級(jí)、100級(jí)、1000級(jí)稀釋倍數(shù)的細(xì)菌、霉菌和酵母菌稀釋培養(yǎng)皿,即可
三、純化水微生物限度檢查法(薄膜過濾法)操作步驟
1、取相當(dāng)于每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液,加至適量的稀釋劑中,混勻,過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數(shù)較多時(shí),可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜,沖洗方法和沖洗量同“計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證”。沖洗后取出濾膜,菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。
2、陰性對(duì)照試驗(yàn) 取試驗(yàn)用的稀釋液1ml,照上述薄膜過濾法操作,作為陰性對(duì)照。陰性對(duì)照不得有菌生長。
3、培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 除另有規(guī)定外,細(xì)菌培養(yǎng)48小時(shí),逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù),一般以48小時(shí)的菌落數(shù)報(bào)告;霉菌、酵母菌培養(yǎng)72小時(shí),逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù),一般以72小時(shí)的菌落數(shù)報(bào)告;必要時(shí),可適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間至5~7天進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并報(bào)告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計(jì)數(shù)。點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)后,計(jì)算各稀釋級(jí)供試液的平均菌落數(shù),按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不少于15,則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。
4、菌數(shù)報(bào)告原則 以相當(dāng)于1g或1ml供試品的菌落數(shù)報(bào)告菌數(shù);若濾膜上無菌落生長,以<1報(bào)告菌數(shù)(每張濾膜過濾1g或1ml供試品),或<1乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。
這是我們上海恩計(jì)儀器公司的純化水微生物檢測(cè)部分內(nèi)容,請(qǐng)大家參考,以上就是針對(duì)客戶提出問題的解答。上海恩計(jì)儀器是專業(yè)生產(chǎn)微生物限度檢測(cè)儀廠家,我們的微生物限度儀都深受用戶的好評(píng),是一家值得信賴的廠家。歡迎廣大客戶前來咨詢訂購或到廠考察。
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